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四环素检测试剂盒使用说明 - 俄罗斯专享会284

俄罗斯专享会284的四环素类检测试剂盒说明书(酶联免疫法)主要用于检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的四环素类药物(Tetracyclines,TCs)。该试剂盒采用间接竞争ELISA方法,并由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及相关试剂组成。

四环素检测试剂盒使用说明 - 俄罗斯专享会284

1. 原理与用途

在检测过程中,添加标准品或样品溶液。样本中的四环素类药物与酶标板上预包被的偶联抗原竞争抗体,随后加入酶标记物。通过TMB底物显色,样本的吸光度值与其四环素类药物含量呈负相关。借助标准曲线可计算出样本中的药物残留量。

2. 技术指标

2.1 灵敏度

灵敏度达到0.05 ppb (ng/ml)。

2.2 反应模式

反应条件为37℃,反应时间为30分钟、30分钟和15分钟。

2.3 检测下限

  • 组织、肝脏、鸡蛋:2 ppb
  • 蜂蜜:2 ppb
  • 尿样:0.5 ppb
  • 牛奶:2 ppb
  • 奶粉:4 ppb

2.4 交叉反应率

  • 四环素:100%
  • 强力霉素:70%
  • 金霉素:10%
  • 土霉素:10%

2.5 样本回收率

  • 组织:85±20%
  • 肝脏、鸡蛋:75±20%
  • 蜂蜜:85±20%
  • 尿样:80±20%
  • 牛奶、奶粉:75±20%

3. 试剂盒组成

  • 酶标板:96孔
  • 高浓度标准品溶液1瓶:100 ppb
  • 标准品溶液包括:0 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.2 ppb、0.4 ppb、0.8 ppb
  • 酶标记物(红盖):11 ml
  • 抗体工作液(蓝盖):55 ml
  • 底物液A(白盖):6 ml
  • 底物液B(黑盖):6 ml
  • 终止液(黄盖):6 ml
  • 20×浓缩洗涤液(白盖):40 ml
  • 5×复溶液(黄盖):50 ml
  • 说明书:1份
  • 盖板膜:1张
  • 自封袋:1个

4. 所需器材与试剂

4.1 仪器

酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、移液管、天平(感量0.001g)。

4.2 微量移液器

单道: 20 µl-200 µl,100 µl-1000 µl;多道: 300 µl。

4.3 试剂

浓盐酸、无水甲醇。

5. 样本前处理

5.1 样本处理前须知

实验器具应清洁,并使用一次性吸头,避免污染以干扰实验结果。

5.2 配液

  • 配置1:将5×复溶液用去离子水稀释5倍,保存于4℃一个月。
  • 配置2:将浓缩洗涤液20倍稀释。
  • 配置3:取43 ml浓盐酸和去离子水混合,定容至50 ml,再加入450 ml无水甲醇。

5.3 样本前处理步骤

组织、肝脏、鸡蛋:按步骤处理并加入复溶液。

蜂蜜:严格控制样本量并进行混合。

尿样:用复溶液稀释10倍,确保清亮后再进行分析。

牛奶:样本处理同样严格,稀释确保充分混合。

奶粉:取样严格,并完成混合和稀释步骤。

6. 酶联免疫试验步骤

确保试剂从4℃环境回温,并对洗涤液进行重混。按照标准步骤添加样本并标记微孔。反应过程中要注意避免光照和使用过期试剂。确保每一步操作均匀、彻底。

7. 结果分析

7.1 百分吸光率的计算

采用标准吸光度值与样本平均吸光度值进行计算,以获得百分比。

7.2 标准曲线绘制

以标准液的百分吸光率为纵坐标,对应的标准液浓度(ppb)的对数为横坐标,绘制半对数曲线图,从中可得样本实际浓度。

8. 注意事项

  • 室温低于25℃会影响结果。
  • 洗涤时避免孔内干燥,确保结果稳定。
  • 所有孵育期间需避免光照。
  • 切勿使用过期或不同批次的试剂。
  • 终止液有腐蚀性,应避免皮肤接触。

9. 贮藏与保存期

试剂盒应保存在2-8℃,避免冷冻。有效期为1年,具体生产日期见包装盒。

为确保检测结果的准确性和可靠性,请遵循以上操作步骤并注意实验条件。参考俄罗斯专享会284的样本检测建议,实现高效的实验操作与结果分析。

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