解决CFSE实验难题，俄专284必备解决方案

• 万媛岚|
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细胞增殖是生命科学中的一个基本且关键的过程，而CFSE检测则是研究细胞增殖的有效工具。然而，在实验过程中可能会遇到各种挑战，这些挑战会影响结果的准确性。今天，我们将详细介绍CFSE检测的基本原理，并深入探讨实验中常见的问题及其解决方案，以提高您的实验成功率！

CFSE实验简介

CFDA SE是一种具有膜通透性的荧光染料。当它穿透细胞膜进入活细胞后，可以被细胞内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺（CFSE）。CFSE能够发出强烈的绿色荧光，且因其不穿透细胞膜而能够完整保留在细胞内。此外，CFSE还可以不可逆地与细胞内蛋白的氨基结合，从而标记这些蛋白。未与蛋白结合的多余CFSE则会通过被动扩散回到细胞外培养基，并在后续的清洗过程中被去除。

在CFDA SE标记的细胞分裂过程中，荧光会平均分配到两个子代细胞中，导致荧光强度随着细胞的分裂而逐级递减。通过流式细胞仪，我们可以根据荧光强度的不同来检测不同分裂阶段的细胞，包括未分裂细胞、分裂一次（荧光强度减半）、分裂二次（荧光强度减至四分之一）、分裂三次（荧光强度减至八分之一）等。

CFSE检测的重要参数

在解读CFSE测试结果时，有几个重要参数需要关注：

• Parents、Generation 2-8：分别代表亲代细胞及各子代在总细胞中的占比。
• Proliferation Index：增殖指数，反映细胞受到刺激后发生增殖的强度。
• Precursor Frequency：前体频率，表示发生增殖的细胞在总细胞中的比例。

CFSE实验异常情况分析

在CFSE检测中，可能会遇到一些异常情况，以下是常见问题及其分析：

1. 染色后立刻出现双峰
2. 未检测到增殖
3. 荧光信号超限
4. 亲本峰左移

希望以上总结的CFSE检测常见问题分析能够帮助各位实验人员快速定位并解决难题。更多细胞功能检测的干货内容，请持续关注俄罗斯专享会284的细胞功能专栏，以获取最新的技术和信息。