小鼠纤维肉瘤细胞MCA-205培养指南 - 俄罗斯专享会284

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俄罗斯专享会284推出的小鼠纤维肉瘤细胞MCA-205培养说明书为科研人员提供了详尽的细胞培养指南。以下是该细胞的培养条件、处理步骤及注意事项。

一、细胞培养条件

- **细胞名称**: MCA-205 小鼠纤维肉瘤细胞 - **生长特性**: 贴壁生长 - **冻存条件**: 使用无血清冻存液（货号：C7001） - **培养体系**: 1640培养基 + 10% FBS - **传代方法**: 建议第一次1:2传代 - **备注**: 在2天后更换培养液。

二、细胞收货后的处理

收到细胞后，应立即将其培养至良好状态，满载完全培养液并封好瓶口，以确保运输细胞的最佳状态。操作步骤如下：1. 使用75%酒精消毒细胞瓶外壁，放置于超净台内进行无菌操作。2. 将细胞瓶置于37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态后进行其他处理。3. 通过显微镜观察细胞的生长情况，拍照记录（推荐40x、100x和200x各一张），前三天的照片可作为重要的售后依据。如未提供照片，默认收到状态良好。4. 建议使用原瓶的完全培养基和自配的完全培养基进行对比培养。

三、细胞培养步骤

a、细胞传代

如果细胞未超过80%汇合度，收集培养液至离心管中，保留5ml的完全培养基在37℃、5% CO2孵箱中培养。如果细胞密度超过80%，可进行传代，具体步骤如下：1. 弃去培养基，使用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次。2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1-2ml，并在37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态。3. 当细胞大部分变圆并脱落时，迅速轻敲培养瓶并加入5ml完全培养基终止消化。4. 将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清液，重悬于1-2mL完全培养基中。5. 按1:2比例分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，培养在37℃、5% CO2箱中。

b、细胞冻存

1. 细胞生长至80%覆盖时，弃去培养液，并用PBS清洗一次。2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml，待细胞变圆后加入5ml完全培养基，轻轻吹打使其脱落，然后转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。3. 弃去上清，加入1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转入冻存管中。4. 将冻存管放入-80℃冰箱中，24小时后可转入液氮罐。

c、细胞复苏

1. 从液氮中取出细胞冻存管，迅速置于37℃水浴中解冻，直至无结晶，外壁用75%酒精擦拭。2. 将细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。3. 弃去上清后，用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，置于37℃、5% CO2培养箱中培养。4. 第二天，更换为新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

如在运输过程中发生细胞脱落属于正常现象。请将培养液收集至离心管，离心后加入胰酶进行处理，消化1-2分钟后终止反应，并按步骤进行传代培养。

五、售后条款

1. **可重发情况**: - 运输途中出现细胞丢失或瓶身破损。 - 收到后48小时内提供真实实验结果的细胞污染问题。 - 常温和干冰发货后存活率不佳的情况，需提供相关清晰的照片。 - 其它操作过程如有技术人员判定为责任，及时重发。 2. **不予重发情况**: - 客户自身造成的细胞污染。 - 不正确的操作导致细胞状态不佳。 - 使用非推荐培养体系的细胞状态不良。 - 未提供前三天的细胞照片。

俄罗斯专享会284致力于为科研人员提供高品质的细胞材料和专业的支持服务，确保实验的成功与高效。